作者：韩扬眉 任芳言    来源：中国科学报    发布时间：2020/2/15 12:55:33

    由新型冠状病毒感染肺炎（以下简称新冠肺炎）正在全球蔓延，核酸检测被定为判断是否确诊为新冠肺炎的主要诊断依据。

    针对核酸检测，机械制造及自动化专家、华体网华体网、西安交通大学教授蒋庄德及其团队发表了他们的看法，“核酸检测效果不仅取决于高质量的试剂盒，还有一样十分关键的检测设备——实时荧光定量聚合酶链式反应（PCR）核酸检测仪器，而后者的重要性往往被大家所忽视。”蒋庄德告诉《中国科学报》，实时荧光定量PCR检测仪的特异性、敏感性、稳定性高，有助于早诊断、早治疗。核酸检测的准确率离不开高质量的试剂盒与其相互匹配的高端仪器。

    历经漫长坚守，蒋庄德与10年前加入团队的西安交通大学彭年才教授攻坚克难，研制出具有自主知识产权的国产新型实时荧光定量PCR仪，并实现产业化生产，打破了我国此类高端仪器设备完全依赖进口的局面。在此次新冠肺炎疫情中，这些设备遍布全国各地一线医院，正发挥着重要作用。

    检测利器缺一不可

    “老百姓误以为有了试剂盒就能进行有效的核酸检测了，而事实上是，必须依赖核酸检测试剂和仪器设备的相互配合。就像打印机，要想打印出一份文件，必须打印机本体和墨盒、打印纸张同时具备才可完成。”彭年才表示，应给予PCR检测仪和试剂盒同样的关注。

    彭年才长期专注PCR等先进分子诊断基因检测技术的研究和产品开发，于1997年孵化出高新科技企业西安天隆科技有限公司（以下简称天隆科技）。经过20多年的发展，该公司已成为国内基因检测、分子诊断领域的创新领导者之一。

    2019年年底，新冠肺炎疫情爆发后，天隆科技研发团队第一时间启动了应急机制。今年1月12日，新型冠状病毒基因序列信息公布后，根据新冠病毒的基因序列，研发团队在一周内迅速研发出“新冠状病毒核酸检测试剂盒”，并相继完成其验证、质控和批量生产等。据第三方检测机构测试，试剂盒检测灵敏度达200 copies/mL，灵敏度高、特异性好，临床反馈稳定、可靠。

    “试剂盒的质量和研发速度取决于已有基础和过去的长期积累。事实上，乙肝、艾滋病、SARS等各类病毒核酸检测试剂盒的技术特征、工艺流程等基本是一样的，而正是因为过去我们长期的积累和投入，才能快速响应疫情需求。”彭年才说。

    在彭年才看来，与其配套的实时荧光定量PCR仪也十分关键。“不管是什么病毒，PCR核酸检测仪器是基本不变的，但是仪器的研制过程极为困难。”

    PCR技术是典型的分子诊断技术，由于引入了PCR热循环和基因体外扩增的高灵敏性特征，使得其能对病原体或特定基因进行高效、特异性扩增和检测。也就是说，患者一旦被感染便能及时准确检出病毒，窗口期短，从而抓住宝贵的治疗时间。

    目前，《新型冠状病毒感染的肺炎诊疗方案(试行第五版)》及美国疾病控制与预防中心和世界卫生组织都把实时荧光PCR核酸检测确定为新冠肺炎病例确认、疑似排除和出院的依据。

    团队研制的第二代实时荧光定量PCR仪器实现了快速核酸提取和精确扩增检测，全封闭全流程自动化操作也为一线医护人员的健康安全提供了保障。目前，针对这次疫情，天隆相关检测试剂和设备已在武汉疾控中心、武汉同济医院、武汉金银潭医院、方舱医院移动实验室及全国多家疾控中心和医疗机构用于新冠病毒核酸检测，满足国家重大需求。

    国产仪器担当重任

    高端仪器设备国产化一直是相关科学家和产业界关注的重点，生物医学领域更是如此。在蒋庄德看来，此次疫情更是给高端国产仪器的紧迫性需求敲了一个“警钟”，因其理论瓶颈多、技术难度大等，需要产学研界的共同长期坚守、甘于寂寞，发挥科学家和工匠精神。

    早在10年前，实时荧光定量PCR仪已被多个国际组织和国家认定为病原体检测、突发传染病诊断、生物污染和疫情监测的重要依据。那时，国内应用的此类仪器几乎全部依赖进口，其价格昂贵、需求量大让我国在重大疾病防控方面频频陷入被动局面。

    一直以来，核心技术被“卡脖子”是PCR仪器国产化难以逾越的鸿沟。蒋庄德和彭年才团队不断探索，突破了多通道荧光检测和荧光定量技术，在保证荧光采集速度快的同时保持了极高的灵敏度、信噪比及抗干扰性；设计出一套基因扩增定量分析系统，实现了PCR扩增结果实时定量，以及实现PCR 热循环基因扩增和高分辨分析等。

    “得益于国家科技部、国家重大研发计划、国家自然科学基金委等项目的长期支持，我们实现了从第一代定性PCR仪器，到广泛使用的第二代实时荧光定量PCR仪器，在核心技术、制造工艺、性能指标等各方面实现了与国际旗鼓相当的水平，价格则低于国外同水平的产品。”彭年才自豪地说。目前，PCR仪器的国产化率已达到30%-40%。

    这一国产第二代实时荧光定量PCR仪器不仅在此次新冠肺炎疫情中“担当重任”，它们已在2009年甲型H1N1、非洲埃博拉病毒、艾滋病以及猪瘟等突发传染病中被国际社会所“检阅”，且广受认可。

    去年年初，蒋庄德和彭年才团队再次获得国家重点研发计划“重大科学仪器设备开发” 重点专项的支持，进一步研发“荧光数字基因扩增单分子检测仪”。

    这一次他们要将仪器再次升级为第三代“数字PCR”，“它相比荧光定量PCR具有更好的灵敏度和精确性，尤其在痕量核酸定量分析、稀有突变检测、核酸拷贝数变异和基因表达微小差异等精准医学和生命科学研究中具有显著优势。”彭年才说。

    加快转化关键在用

    多年的研发和市场推广经历，让彭年才最为感触的是，产学研用四位一体，高新技术是基础，但“用”也尤为关键。“如果市场不了解不认可，再高水平的成果，其价值会大打折扣。”

    近年来，关于核酸检测的新技术、新成果也不断涌现。

    比如，美国布罗德研究所、加州大学伯克利分校的研究团队曾相继开发出基于基因编辑技术的核酸检测工具。利用CRISPR系统中的效应蛋白，可快速检测RNA或DNA分子。通过后续优化，研究者可通过微型试纸条实现病毒检测。

    “实现核酸病毒的快速检测，在科学原理层面已经被证实是可行的了”， 清华大学药学院研究员李寅青表示，“难的是让这些成果走出实验室，立刻产生实际作用，就像寻常百姓家庭用的温度计。”

    国内一位开发基于CRISPR系统的核酸检测工具的研究者告诉《中国科学报》，新技术“从实验室到临床有相当的距离，还需要时间来打磨。”

    “疫情之后，我们还需认真梳理如何发挥科技硬实力服务国家重大需求的作用，特别是仪器科学领域，需要有着长期连续性的支持和投入，营造允许失败的宽松环境，形成产业全链条发展的良好机制，加快科技成果转化，只有这样，我们才能在坚实的积累中取得突破。”蒋庄德说。

    原文：http://news.sciencenet.cn/htmlnews/2020/2/435770.shtm